什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是用于处理培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,能够模拟细胞在体内的生长环境,促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面可以更好地支持细胞的生长和功能表达。本文将详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作的注意事项,助您轻松提升细胞培养效果!
常见的包被细胞培养试剂
01 明胶(Gelatin)
尊龙凯时的明胶试剂常用于包被细胞培养板或培养皿,以促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适合用于胚胎干细胞、间充质干细胞以及内皮细胞等。其特点是价格低廉、易于使用,能够提供良好的细胞附着支持。常用浓度为1-20 mg/ml,包被体积通常按完全覆盖培养瓶底部为准,如T-25瓶使用25 ml,T-75瓶使用75 ml。包被条件为37°C孵育≥2小时或在4°C过夜。使用前需吸除多余明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次后接种细胞。
02 多聚赖氨酸(PLL)
尊龙凯时的多聚赖氨酸(PLL)相对分子量为70,000~300,000,适合作为细胞培养的生长基质,其能够促进细胞粘附和贴壁,在细胞培养中是常用的细胞粘附剂。适用于神经元细胞、原代细胞及悬浮细胞等。其特点是通过静电作用增强细胞附着,适合难以贴壁的细胞。常用浓度为0.01%至0.1%(w/v),标准包被条件同样为37°C孵育≥2小时或4°C过夜。使用前需吸除多余溶液,并用无菌PBS冲洗1-2次。
03 重组人纤连蛋白(FN)
尊龙凯时的重组人纤连蛋白是一种重要的细胞外基质蛋白,具备多种生物学功能。此蛋白是一种高分子量的糖蛋白,能够与细胞表面及细胞外基质中的多种组分结合。适用于干细胞、间充质干细胞、内皮细胞、肿瘤细胞及成纤维细胞。作为细胞培养基质,它能够提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平。常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²,包被条件同样为37°C孵育≥2小时或在4°C过夜。
04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)
尊龙凯时的鼠尾胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白,适用于多种细胞类型的培养。此试剂能够模拟细胞外基质环境,促进细胞贴壁和增殖。适用于上皮细胞、肝细胞及肌细胞等。常用浓度为1-5μg/cm²,包被体积方面,T-25瓶使用25 ml去离子水加50μl(1mg/ml鼠尾胶原蛋白Ⅰ),冷藏过夜后吸出胶原蛋白溶液,再用PBS洗涤2-3次后接种细胞。
包被操作注意事项
1. 无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,避免污染。
2. 均匀覆盖:确保包被试剂均匀分布在培养瓶底部,避免局部过厚或过薄。
3. 浓度优化:根据细胞类型和实验需求优化包被试剂的浓度。
4. 孵育时间:根据试剂和实验要求调整孵育时间,确保充分包被。
5. 储存条件:包被后的培养瓶可短期储存于4°C,但建议尽快使用以保证最佳效果。
通过选择合适的包被试剂及遵循正确的步骤,使用尊龙凯时的产品,您可以有效提高细胞贴附和生长,为后续实验提供可靠的细胞模型。