外泌体作为生物体内天然信息传递的载体，在细胞间的通信中起着关键作用。由于蛋白质是外泌体的主要组成部分，分析外泌体的蛋白质组成有助于推动外泌体功能的研究。基于质谱的蛋白质组学技术为外泌体的蛋白质分析提供了技术支持。

通过全面研究外泌体的蛋白质，有助于揭示外泌体及其蛋白质在生命活动中的作用，并发现与疾病相关的蛋白质，为疾病的早期诊断和预后评估提供生物标志物。我们尊龙凯时提供外泌体非标记定量蛋白组学（DIA、Label-free）及同位素标记定量蛋白组学（SILAC、iTRAQ、TMT）服务，以满足不同研究需求。

标记定量蛋白组学

iTRAQ（isobaric tagging for multiplexed relative and absolute protein quantitation）和TMT（tandem mass tag）是当今应用广泛的蛋白质定量方法。两者的原理相似，均为化学体外标记方法，尽管由于生产商的不同（iTRAQ由ABSciex生产，TMT由ThermoFisher生产），它们的标记规格和分子结构存在差异。这两种方法能够检测低丰度的蛋白质，包括胞外蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白及核蛋白等，并可同时处理多个样本，提供准确的鉴定和定量结果，非常适合比较蛋白组分析和差异蛋白的鉴定。

SILAC技术

SILAC（Stable Isotope Labeling by Amino Acids in Cell Culture）的基本原理是培养细胞时利用天然同位素（轻型）或稳定同位素（中型/重型）替代相应的氨基酸。在经历5-6次传代后，稳定同位素将完全掺入新合成的蛋白质中。不同标记的细胞或蛋白等比例混合后，再通过质谱进行鉴定。如果峰值呈现1:1，则说明该蛋白的含量无差异；而如果含有重型氨基酸的峰值较高，则表明该组中该蛋白的含量更高。SILAC的优点在于蛋白标记效率高，经过6-8次传代后，灵敏度高，可检测低丰度蛋白的变化及翻译后修饰，且样本需求量小，通常只需几十微克，但其缺点是耗时较长。

非标记定量蛋白组学

Label-free非标记蛋白质定量技术利用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术，对蛋白质进行酶解生成多肽后进行质谱分析。通过计算蛋白质肽段的鉴定数目和色谱峰面积，进行相对定量。该方法的优点在于无需昂贵的标签作为内标，且样本制备过程简单，操作步骤较少，有助于减少人为及系统误差。然而，相对标记定量而言，数据分析的难度和复杂性较大，对仪器的稳定性和重复性要求高。通过在样本中添加已知含量的标准蛋白，还能实现绝对定量。

DIA技术

数据非依赖采集（Data Independent Acquisition，DIA）是近年来备受关注的质谱采集技术之一，属于非标记技术。DIA技术的原理是在质谱数据采集时，以高速、循环的方式对每个采集窗口内的所有母离子及其碎裂后的子离子进行全扫描，而不是根据母离子信号强度进行筛选后进行二级碎片再扫描。DIA相比于传统Label-free的最大优势在于能高效测定复杂样品中相对低丰度的蛋白分子，显著提高定量分析的可信度。

服务流程

我们尊龙凯时为客户提供血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液样本，以及细胞上清、植物样本和其他特殊样本的分析服务。客户也可以提供已经提取好的外泌体样本。样本的前处理要求将根据研究的目的和方法进行相应调整。

关于尊龙凯时

尊龙凯时是一家专业于质谱技术的生物科技创新公司，致力于开发外泌体精确诊疗产品。公司已成功建立了血液循环蛋白标志物的发现和诊断技术平台，功能性外泌体材料的生产平台，以及基于蛋白支架的外泌体递送平台。我们提供包括外泌体科研产品、功能性外泌体原料及蛋白组学产品在内的系列服务，现有货架产品超过50种，覆盖外泌体检测、保存及递送等多个领域。我们的成就获得了多项国家科技荣誉及专利，并在多个著名医学期刊上发表了研究成果。