尊龙凯时猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

产品概述

产品名称：猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Test Kit for Antibodies to Porcine Pseudorabies Virus gE (ELISA)

包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

伪狂犬病，又称奥耶斯基氏病，是由伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引发的一种急性传染病，主要影响家畜及多种野生动物，特征包括发热、瘙痒、呼吸和神经系统相关疾病。疫苗免疫使用的为gE基因缺失疫苗，因此，检测gE蛋白抗体可以作为野毒感染的标志。本产品旨在检测猪血清中抗伪狂犬病毒gE蛋白的抗体，可以有效区分临床野毒感染的猪与使用gE基因缺失疫苗免疫的猪。

检测原理

本试剂盒包含预包被猪伪狂犬病毒重组gE蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂，应用酶联免疫法（ELISA）的原理用于检测猪血清和血浆样本中的伪狂犬病毒gE蛋白抗体。样品中的抗体若与酶标板上的抗原结合，经过洗涤去除未结合成分后，加入酶标记物进行特异性结合。最后通过底物液反应生成蓝色产物，显色深度与样品中特异性抗体数量正相关。加入终止液后，产物变为黄色，并在450nm波长下测定吸光值，从而判断样品是否含有伪狂犬病毒gE蛋白抗体。

试剂盒组成

本试剂盒的组成如下：

• 酶标记物：11ml×1（红盖），26ml×2（红盖）
• 样品稀释液：50ml×1（黄盖），200ml×1（透明）
• 浓缩洗涤液：40ml×1（白盖），200ml×1（透明）
• 底物液A：6ml×1（白盖），26ml×1（白盖）
• 底物液B：6ml×1（黑盖），26ml×1（黑盖）
• 终止液：6ml×1（黄盖），26ml×1（黄盖）
• 阳性对照：10ml×1（红盖），20ml×1（红盖）
• 阴性对照：10ml×1（绿盖），20ml×1（绿盖）
• 酶标板：96T×1
• 说明书：1份

储存及有效期

请在2～8℃环境下保存，确保有效期为12个月。开封后的包被板应避光保存，防止潮湿，推荐使用期限为2个月。

适用仪器

本试剂盒适用于具有450nm及630nm波长的酶标仪，以及37℃恒温设备和可调微量移液器。

样品准备

1. 取全血并采用常规方法制备清亮血清，确保无溶血与污染，样品可在2～8℃保存一周，长期需置于-20℃保存。

2. 待检血清应使用样品稀释液按10倍稀释，阴、阳性对照不需稀释。

3. 使用前，将浓缩洗涤液调至室温并用蒸馏水或去离子水稀释20倍形成工作洗涤液。

检验方法

1. 使用前将试剂盒放置在室温下恢复30分钟。

2. 按需取酶标板条，设定阴性及阳性对照孔。

3. 将阴、阳性对照各100μl加入对应孔中，样品孔中加入90μl样品稀释液和10μl稀释血清。

4. 混匀后，覆盖膜并置于37℃避光反应30分钟。

5. 使用工作洗涤液清洗孔，之后加入酶标记物反应30分钟。

6. 重复洗涤，依次加入底物液A、B反应10分钟，再加入终止液并测定吸光值（A值）。

结果解释

在正常实验条件下，阴性对照A值应≤0.10，阳性对照A值≥0.6。若样品A值≥0.38，则为阳性，介于0.2到0.38之间为可疑，A值＜0.2则为阴性。

尊龙凯时的试剂盒检测结果为阳性表明该猪可能存在野毒感染，或为使用非gE基因缺失疫苗免疫。

注意事项

在实验过程中，请务必佩戴手套及工作服，严格遵循消毒隔离制度，处理废弃物时请按传染物处理。终止液具有腐蚀性，避免皮肤接触，如发生接触请立即用大量水冲洗。酶标板在开袋之前需恢复至室温，未用完的板条需放入干燥剂密封保存。同样，浓缩洗涤液应完全溶解后使用，确保每个孔都加满洗涤液以防留有游离酶，确保样品的新鲜度，并以酶标仪的读数为判定依据，不可混用不同批号的试剂。