尊龙凯时提供的永生化小鼠肝枯否细胞（Kupffer细胞）是一个高度可靠的体外模型，广泛应用于肝脏炎症反应及肝脏疾病病理机制的研究。以下是我们对这一产品的应用案例分享。

一、产品介绍

尊龙凯时的永生化小鼠肝枯否细胞为研究肝脏相关疾病提供了重要的实验平台。其稳定性和可靠性使其成为探索肝脏炎症及相关病理机制的重要工具。

二、实验方法

我们从尊龙凯时获取的永生化小鼠肝枯否细胞在含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素的DMEM培养基中，于37°C、5% CO2的培养箱中进行培养。当细胞生长至80-90%汇合时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化，随后按照1:4的比例传代。实验所用药物均溶解于DMSO中，并制备成不同浓度的储存液，储存于-20°C。接种约5×10^3个细胞于96孔板中，经过24小时后，移除培养基，更换为含有不同浓度药物的新鲜培养基。对照组仅含DMSO，实验组则使用不同浓度的药物，每组设有6个复孔。药物处理24小时后，向每孔中加入20µL的5 mg/mL MTT溶液，继续培养4小时。移除MTT溶液后，添加150µL DMSO并震荡10分钟以溶解甲臜晶体，最后使用酶标仪在570 nm波长下测量吸光度（OD值）。在药物处理24小时后，收集细胞培养上清液，并依照ELISA试剂盒说明书检测上清液中TNF-α和IL-6的含量。数据分析采用GraphPad Prism软件，组间比较使用单因素方差分析（ANOVA）后进行Tukey’s多重比较检验，所有数据以平均值±标准差（SD）表示，P值小于0.05被认为具有统计学意义，并确保实验结果的可靠性，至少重复三次。

三、实验结果

实验结果显示，与对照组相比，药物处理的永生化小鼠肝枯否细胞在尊龙凯时的实验中展现出显著降低的细胞活力（P<0.05）和提高的TNF-α与IL-6水平（P<0.05），这表明所测试的药物可能具有抗炎作用。

四、结语

永生化小鼠肝枯否细胞是尊龙凯时为肝脏炎症研究提供的稳定且可靠的实验工具。我们的应用案例展示了该产品在药物筛选与炎症机制研究中的重要性。我们期待与广大科研工作者的协作，共同促进肝脏疾病研究领域的发展。